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一种基于氧化血元素可控制聚集的水胺硫磷便捷检测方法

一种基于氧化血元素可控制聚集的水胺硫磷便捷检测方法

  • 专利类型:发明专利
  • 有效期:不限
  • 发布日期:2021-04-01
  • 技术成熟度:详情咨询
交易价格: ¥面议
  • 法律状态核实
  • 签署交易协议
  • 代办官方过户
  • 交易成功

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  • 技术(专利)类型 发明专利
  • 申请号/专利号 201511001930.X 
  • 技术(专利)名称 一种基于氧化血元素可控制聚集的水胺硫磷便捷检测方法 
  • 项目单位 贵州大学
  • 发明人  
  • 行业类别 人类生活必需品
  • 技术成熟度 详情咨询
  • 交易价格 ¥面议
  • 联系人 吴佳琨
  • 发布时间 2021-04-01  
  • 01

    项目简介

    本发明公开了一种基于氯化血红素可控聚集的水胺硫磷便捷检测方法,其特征在于:包含以下步骤:(1)将随机ssDNA序列与含有水胺硫磷的样品混匀孵育,制备出待测样液;(2)将待检测样液与Hemin混匀孵育,之后加入极性有机溶剂混匀,通过测定混合溶液在B带处的吸光值变化来判断水胺硫磷的含量。
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  • 02

    说明书


    1.一种基于氯化血红素可控聚集的水胺硫磷便捷检测方法,其特征在于:包含以下步骤:(1) 将随机ssDNA序列与含有水胺硫磷的样品混匀孵育,制备出待测样液;(2) 将待检测样液与氯化血红素混匀孵育,之后加入极性有机溶剂混匀,通过测定混合溶液在B带处的吸光值变化来判断水胺硫磷的含量;加入的极性有机溶剂为二甲基亚砜、甲醇、乙醇或乙腈;用酶标仪计进行扫描测定B带吸收峰;具体的扫描条件为:在二甲基亚砜体系中吸收峰值测定波长为404nm,在甲醇体系中吸收峰值测定波长为397nm,在乙醇体系中吸收峰值测定波长为398nm,在乙腈体系中吸收峰值测定波长为398 nm;全波长扫描范围为300-800nm,获得其吸收光谱;根据样品在不同有机溶剂中测得的吸光度值,查标准曲线,可以求得不同样品中水胺硫磷的含量。
    2.根据权利要求1所述的一种基于氯化血红素可控聚集的水胺硫磷便捷检测方法,其特征在于:上述步骤(1)中,随机ssDNA序列的使用浓度为7.5 nM。
    3.根据权利要求1所述的一种基于氯化血红素可控聚集的水胺硫磷便捷检测方法,其特征在于:所述步骤(2)中,氯化血红素的使用浓度为10 μM。
    4.根据权利要求1所述的一种基于氯化血红素可控聚集的水胺硫磷便捷检测方法,其特征在于:(1) 制备已知水胺硫磷浓度的检测体系:取14支1.5 mL刻度离心管,分别加入7.5 μL浓度为500 nM随机ssDNA序列母液和不同浓度的水胺硫磷标准液,总体积≤10μL,充分混匀后置于30℃条件下孵育30min,之后加入5 μL浓度为1 mM的氯化血红素母液继续孵育30min;最后再加入极性有机溶剂至500 μL,充分混匀后留作以下测定用;(2) 另取1支按步骤(1)方法制备的检测溶液,加入5 μL三蒸水替代水胺硫磷标准液,处理后作为空白对照体系溶液;(3) 分别取200μL步骤(1)和步骤(2)制备的标准溶液和空白对照液置于96孔酶标板中,用酶标仪计进行扫描测定B带吸收峰;具体的扫描条件为:在二甲基亚砜体系中吸收峰值测定波长为404nm,在甲醇体系中吸收峰值测定波长为397nm,在乙醇体系中吸收峰值测定波长为398nm,在乙腈体系中吸收峰值测定波长为398 nm;全波长扫描范围为300-800nm,获得其吸收光谱;(4) 以不同浓度的水胺硫磷与测定的ΔA作图,绘制标准曲线,ΔA=空白样品的吸光值-待测样品的吸光值;(5) 制备样品检测体系:取5μL实际样液,按步骤(1)方法制备的检测溶液,充分混匀后按步骤(3)方法测定其吸收峰值;(6) 根据样品在不同有机溶剂中测得的吸光度值,查标准曲线,可以求得不同样品中水胺硫磷的含量。
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