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一种灵菌红素产生菌及其发酵生产灵菌红素的方法

一种灵菌红素产生菌及其发酵生产灵菌红素的方法

  • 专利类型:发明专利
  • 有效期:不限
  • 发布日期:2021-07-15
  • 技术成熟度:详情咨询
交易价格: ¥面议
  • 法律状态核实
  • 签署交易协议
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  • 交易成功

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  • 技术(专利)类型 发明专利
  • 申请号/专利号 CN201310425098.0 
  • 技术(专利)名称 一种灵菌红素产生菌及其发酵生产灵菌红素的方法 
  • 项目单位 中国科学院烟台海岸带研究所
  • 发明人 焦绪栋;秦松;李莉莉 
  • 行业类别 化学、冶金
  • 技术成熟度 详情咨询
  • 交易价格 ¥面议
  • 联系人 李志文
  • 发布时间 2021-07-15  
  • 01

    项目简介

    本发明属于发酵工程技术领域,具体为一种灵菌红素产生菌及其发酵生产灵菌红素的方法。该菌为产酸克雷伯菌Klebsiella oxytoca,于2013年6月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC保藏,保藏编号:CGMCC No.7816,保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所。该菌能够发酵产生灵菌红素,采用改良的无机盐培养基,避光培养,温度24~28℃、培养时间20~26h、转速250~360rpm,色素产量可达70~90mg/L。所产的灵菌红素对自然光、紫外线敏感,对金黄色葡萄球菌、甲型副伤寒沙门菌、白色念球菌具有抑制活性。该菌在灵菌红素的发酵生产及其抗肿瘤、食品和化妆品等领域具有很好的应用前景。
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  • 02

    说明书


    1.一种灵菌红素产生菌,其特征在于:该菌为产酸克雷伯菌Klebsiella oxytoca,于2013年6月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC保藏,保藏编号:CGMCC No.7816,保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所。
    2.按照权利要求1所述的灵菌红素产生菌,其特征在于:该菌代号为P11,在普通LB固体培养基平板上,该菌菌落呈红色,呈规则的圆形,表面湿润,革兰氏染色为阴性。
    3.按照权利要求1所述的灵菌红素产生菌,其特征在于:该菌的菌株16SrDNA的GenBank登陆号为:KF657724。
    4.一种利用权利要求1所述的灵菌红素产生菌发酵生产灵菌红素的方法,其特征在于,发酵培养基采用改良的无机盐培养基,利用改良的无机盐培养基和优化的培养条件进行发酵;所述改良的无机盐培养基中,lL培养基中含有如下成分:氯化钠0~0.05g,磷酸二氢钾1g,磷酸氢二钾3g,氯化铵1g,硫酸镁1g,硝酸铵2g,酵母粉0.1g,果糖或葡萄糖10~20g,余量为水,pH8.0~10.0;所述的培养条件:避光,发酵温度24~28℃,时间20~26h,摇床转速250~360rpm。
    5.按照权利要求4所述的灵菌红素产生菌发酵生产灵菌红素的方法,其特征在于,所述的培养条件具体如下:将经过种子培养基培养获得的种子液按照0.5~2wt%接种至发酵培养基中,避光,培养温度24~28℃,转速250~360rpm,培养20~26h;至菌液产生明显红色产生;每间隔1~2h,测定菌液的600nm吸光值,当OD600达到1.5~2.0,将菌液10000~12000rpm离心3~5min,上清液和沉淀分别用体积比1:1~1:2乙酸乙酯和3~5倍体积的丙酮萃取,将获得的乙酸乙酯萃取液和丙酮萃取液经50~60℃减压蒸馏至总体积的1~2%,混合后冷冻干燥得灵菌红素粗品,灵菌红素产量70~90mg/L;冷冻干燥后溶于酸性甲醇,测定537nm吸光值。
    6.按照权利要求5所述的灵菌红素产生菌发酵生产灵菌红素的方法,其特征在于,取10~100μL-80℃保存的灵菌红素产生菌浓度为50~70wt%的甘油菌液接种在5~10mL的种子培养基中;种子培养基采用LB液体培养基,其成分为1L培养基中含有:胰蛋白胨10g,酵母粉5g,氯化钠10g,余量为水,pH7.0~8.0;培养条件:28~30℃,150~250rpm,培养时间12~24h,至OD600nm达到0.6~
    1.2,肉眼观察色素的产生,得到种子液;将上述种子液按照0.5~2wt%接种至上述发酵培养基中,避光,培养温度20~28℃,转速150~300rpm,培养18~24h得到发酵液。
    7.按照权利要求4所述的灵菌红素产生菌发酵生产灵菌红素的方法,其特征在于:将获得的灵菌红素溶于二甲基亚砜或甲醇,配制浓度为0.5~1g/L,对金黄色葡萄球菌、甲型副伤寒沙门菌、白色念球菌或铜绿假单胞菌具有抑制活性。
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